扦插中基质是什么意思(扦插基质如何配制)
1. 扦插基质如何配制
以不含养分或少含养分、透水、透气、保水的基质为好,以便生根。如蛭石、河沙等。有些易生根的种类可直接插于土中,有些可以直接插于水中。
2. 扦插基质配土
1/2MS+0.5mol/L NAA
(1)配制ms大量元素母液 一般将大量元素分别配制成100倍的母液,使用时再分别稀释100倍。 分别称取 nh4no3 165g kh2po4 17g kno3 190g cacl2·2h2o 44g mgso4·7h2o 37g 各自配成1l的母液。倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 (2)配制ms微量元素母液 一般将微量元素配制成100倍母液。 依次称取 ki 0.083g na2moo4·2h2o 0.025g h3bo3 0.62g cuso4·5h2o 0.0025g mnso4·h2o 1.69g cocl2·6h2o 0.0025g znso4·7h2o 0.86g 配成1l母液,倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 cuso4·5h2o和cocl2·6h2o 由于称取量很小,如果天平精确度没有达到万分之一,可先配成调整液。 分别称取 cuso4·5h2o 0.05g cocl2·6h2o 0.05g 各自配成100ml的调整液,然后取5ml就还有0.0025g的量。 (3)配制ms有机母液 一般配制成100倍ms有机母液。 依次称取 肌醇 10g 盐酸硫胺素(vb1) 0.01g 烟酸 0.05g 甘氨酸 0.2g 盐酸吡哆醇(vb6) 0.05g 配成1l母液,倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 (4)配制ms铁盐母液 一般配制成100倍ms铁盐母液。 依次称取 edta二钠 3.73g feso4·7h2o 2.78g 配成1l母液,倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 所以ms母液有5种大量元素母液,加上ms微量元素母液、ms有机母液和ms铁盐母液,共8种母液。 激素母液的配制 各种生长素和细胞分裂素要单独配制,不能混合在一起,生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的naoh溶解,细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解,然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。 2、配制培养基 以配置1l ms培养基为例,按顺序进行如下操作: (1)先在烧杯中放入一些蒸馏水。 (2)分别取上面八种母液10ml倒入。 (3)一般称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解。 (4)加蒸馏水用量筒定溶至1l。 (5)按设计好的方案添加各种激素,由于激素的用量很小,而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取,减少误差。 (6)用精密试纸或酸度计调整ph至5.7-5.8。(有条件的话使用酸度计,比较精确) 可配1当量的hcl和1当量的naoh用来调溶液ph值。 1当量hcl配制:用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。 1当量naoh配制:称取naoh 4g 配成100ml溶液。 (7)称取5g左右琼脂粉(质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热至沸腾,直到琼脂粉熔化。 (8)稍微冷却后,分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口,用橡皮筋或绳子扎紧。 (9)放入消毒灭菌锅灭菌,灭菌20分钟左右。 (10)灭菌后从灭菌锅中取出培养基,平放在实验台上令其冷却凝固。
二、灭菌
灭菌是组织培养重要的工作之一。初学者要清楚有菌和无菌的范畴。有菌的范畴是:凡是暴露在空气中的物体,接触自然水源的物体,至少它的表面都是有菌的。依此观点,无菌室等未处理的地方、超净台的表面、简单煮沸的培养基、我们使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及与外界相连的内表,如整个消化道、呼吸道,即我们呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌的。 这里所指的菌,包括细菌、真菌、放线菌、藻类及其他微生物。菌的特点是:极小,肉眼看不见。无处不在,无时不有,无孔不入。在自然条件下忍耐力强,生活条件要求简单,繁殖力极强,条件适宜时便可大量滋生。 无菌的范畴是:经高温灼烧或一定时间蒸煮过后的物体,经其他物理或化学的灭菌方法处理后的物体(当然这些方法必须已经证明是有效的),高层大气、岩石内部、健康的动、植物的不与外部接触的组织内部,强酸强碱,化学元素灭菌剂等表面和内部都是无菌的。从以上可以看出:在地球表面无菌世界要比有菌世界小的多。 灭菌是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,即把所有生命的物质全部杀死。与此相关的一个概念是消毒,它指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用,显然经过消毒,许多细菌芽孢、霉菌厚垣孢子等不会完全杀死,即由于在消毒后的环境里和物品上还有活着的微生物,所以通过严格灭菌的操作空间(接种、超净台等)和使用的器皿,以及操作者的衣着和手都不带任何活着的微生物。在这样的条件下进行的操作,就叫做无菌操作。 植物组织培养对无菌条件的要求是非常严格的,甚至超过微生物的培养要求,这是因为培养基含有丰富的营养,稍不小心就引起杂菌污染。要达到彻底灭菌的目的,必须根据不同的对象采取不同的切实有效的方法灭菌,才能保证培养时不受杂菌的影响,使试管苗能正常生长。 常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类,即:物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施;化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。 1、培养基用湿热灭菌 培养基在制备后的24小时内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是:在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1mpa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。 注意完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,灭菌才能彻底。高压灭菌放气有几种不同的做法,但目的都是要排净空气,使锅内均匀升温,保证灭菌彻底。常用方法是:关闭放气阀,通电后,待压力上升到0.05mpa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀。 关阀再通电后,压力表上升达到0.1mpa时,开始计时,维持压力0.1-0.15mpa,20分钟。 按容器大小不同,保压时间有所不同,见表。该表所列数字是彻底灭菌很保险的数字,如果容器体积较大,但是放置的数量很少,也可以减少时间。
三、接种
接种时由于有一个敞口的过程,所以是极易引起污染的时期,这一时期主要由空气中的细菌和工作人员本身引起,接种室要严格进行空间消毒。接种室内保持定期用1%-3%的高锰酸钾溶液对设备、墙壁、地板等进行搽洗。除了使用前用紫外线和甲醛灭菌外,还可在使用期间用70%的酒精或3%的来苏儿喷雾,使空气中灰尘颗粒沉降下来。无菌操作可按以下步骤进行: (1)在接种4小时前用甲醛熏蒸接种室,并打开其内紫外线灯进行杀菌; (2)在接种前20分钟,打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯; (3)接种员先洗净双手,在缓冲间换好专用实验服,并换穿拖鞋等; (4)上工作台后,用酒精棉球搽拭双手,特别是指甲处。然后搽拭工作台面; (5)先用酒精棉球搽拭接种工具,再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍,然后反复过火尖端处,对培养皿要过火烤干; (6)接种时,接种员双手不能离开工作台,不能说话、走动和咳嗽等; (7)接种完毕后要清理干净工作台,可用紫外线灯灭菌30分钟,若连续接种,每5天要大强度灭菌一次。 接种是将已消毒好的根、茎、叶等离体器官,经切割或剪裁成小段或小块,放入培养基的过程。现将接种前后的程序连贯地介绍。 无菌接种步骤: (1)将初步洗涤及切割的材料放入烧杯,带入超净台上,用消毒剂灭菌,再用无菌水冲洗,最后沥去水分,取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。 (2)材料吸干后,一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀,对材料进行适当的切割。如叶片切成0.5cm平方的小块;茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含1-2片幼叶的茎尖大小等。在接种过程中要经常灼烧接种器械,防止交叉污染。 (3)用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。具体操作过程(以试管为例)是:先解开包口纸,将试管几乎水平拿着,使试管口靠近酒精灯火焰,并将管口在火焰上方转动,使管口里外灼烧数秒钟。若用棉塞盖口,可先在管口外面灼烧,去掉棉塞,再烧管口里面。然后用镊子夹取一块切好的外植体送入试管内,轻轻插入培养基上。若是叶片直接附在培养基上,以放1-3块为宜。至于材料放置方法除茎尖、茎段要正放(尖端向上)外,其他尚无统一要求。接种完后,将管口在火焰上再灼烧数秒种。并用棉塞,塞好后,包上包口纸,包口纸里面也要过火。
四、培养
培养指把培养材料放在培养室(有光照、温度条件、无菌)里,使之生长,分裂和分化形成愈伤组织或进一步分化成再生植株的过程。 1、培养方法 (1)固体培养法 即用琼脂固化培养基来培养植物材料的方法。是现在最常用的方法。虽然该方法设备简单,易行,但养分分布不均,生长速度不均衡,并常有褐化中毒现象发生。 (2)液体培养法 即用不加固化剂的液体培养基培养植物材料的方法。由于液体中氧气含量较少,所以通常需要通过搅动或振动培养液的方法以确保氧气的供给,采用往复式摇床或旋转式摇床进行培养,其速度一般为50-100r/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给。
3. 扦插基质如何配制培养基
水仙花繁殖方法
1、侧球繁殖
这是最普通常用的一种繁殖方法。储球着生在鳞茎球外的两侧,仅基部与母球相连,很容易自行脱离母体,秋季将其与母球分离,单独种植,次年产生新球。
2、侧芽繁殖
侧芽是包在鳞茎球内部的芽。只在进行球根阉割时,才随挖出的碎鳞片一起脱离母体,拣出白芽,秋季撒播在苗床上,翌年产生新球。
3、双鳞片繁殖
(1)一个鳞茎球内包含着很多侧芽,有明显可见的,有隐而不见的。但其基本规律是闲两张鳞片1个芽。
(2)用带有两个鳞片的鳞茎盘作繁殖材料就叫双鳞片繁殖。
(3)其方法是把鳞茎先放在低温4-10℃处4-8周,然后在常温中把鳞茎盘切小,使每块带有两个鳞片,并将鳞片上端切除留下2厘米作繁殖材料,然后用塑料袋盛含水50{bf}的蛭石或含水6{bf}的砂,把繁殖材料放入袋中,封闭袋口,置20-28℃温度中黑暗的地方。
(4)经2-3月可长出小鳞茎,成球率80-90{bf}。这是近年开始发展的新方法,四季可以进行,但以4-9月为好。
4、组织培养
用MS培养基,每升附加30克蔗糖与5克的活性炭,用芽尖作外植体,或用具有双鳞片的茎盘5×10毫米作外植体,PH值5-7;装入20x100毫米的玻璃管中,每管10毫升培养基,经消毒后,每管植入一个外植体,然后在25℃中培养,接种10天后产生小突起,20天后成小球,1月后转入在含NAA0.1/毫克1/2MS的培养基中,6-8周后有叶、有根,移栽在大田中,可100{bf}的成活。用茎尖作外植体的,还有去病毒的作用。
4. 扦插基质的配比
山木香扦插春秋季节最合适,因为春秋季节温度适宜,山木香生长相对旺盛,有利于扦插的成活率。以下是山木香扦插时的一些注意事项:
(1)扦插土壤的准备
用来扦插山木香的土壤基质需要是比较疏松肥沃、排水性良好的类型,比如椰糠,珍珠岩,河沙也可以。
(2)选取健壮的插穗
山木香老桩虽然也可以扦插成活,但选取当年生的健壮,没有病虫害,没有破损的枝条更合适。
5. 目前扦插繁殖中所用基质有哪三种状态
常用的扦插的基质有蛭石、珍珠岩、素沙、泥炭、椰糠、混合介质等,当然了,直接用园土的也有。
在扦插的时候对介质的要求主要是既能保持土壤湿度,又不积水,而且还不能肥效太厉害,这样才有助于生根。蛭石、珍珠园作为无机介质的代表,主要起到的作用是透气性。
在选择基质的时候,只要符合上述的要求就可以了,具体用什么,可以根据我们手头的基质灵活搭配。比如,我们既可以用纯蛭石、珍珠岩、素沙等作为基质扦插,也可以将珍珠岩混入泥炭作为基质。
6. 扦插基质需要营养吗
对于喜欢养花的朋友们而言,蛭石是再熟悉不过的基质了,它价格便宜,自重轻,透气和保水性俱佳,既可以与泥炭、椰糠、珍珠岩进行搭配用于配土养花,起到改良土壤、调节土壤酸碱度的作用;也可以单独用于充当扦插基质,既无菌又透气,而且具有一定的保水性,有利于插穗快速发根,可明显提高扦插繁殖的成活率,一度被大家称之为“扦插神器”。
蛭石扦插月季花
关于蛭石基本特性:
蛭石是经过高温膨胀的矿物硅酸盐材料,色泽偏黄褐色,是略带泡面般扭曲感的小颗粒,自重非常轻,具有一定的粉化性,含有盆栽植物所需要的镁、铁等矿物微量元素,但经过高温膨胀后几乎不含有机质,属于无菌基质。
它用途很广泛,既是配土、扦插育苗常用的基质,也可以用于无土栽培以及给爬行动物充当保温和孵化材料。
用它来扦插月季、天竺葵、蟹爪兰、多肉叶片等,不仅生根快而且长出的根系很发达。
蛭石扦插月季
蛭石属于中性矿物质,不含盐碱,具有一定的吸附能力,用于配土既可以增加土壤蓬松度,而且具有调节土壤酸碱平衡的作用。
同时它也是平价基质,蓬松度高,自重非常轻,用于与泥炭、珍珠岩等进行搭配,可以降低配土的总成本。
蛭石颗粒
蛭石在养花过程中可起到的作用:
蛭石除了起到改良土壤结构,使土壤更疏松透气、防止积水烂根的主要作用以外,它还可以调节土壤的酸碱平衡以及让土壤保持适宜的湿度,加上其吸附作用,可以延长肥料在土壤中的停留时间以及释放周期,对盆栽植物根系的生长以及小苗的稳定发育也有一定的积极作用。
蛭石与泥炭搭配用于扦插天竺葵
使用蛭石注意事项:
蛭石具有粉化性,随着使用周期的延长,会慢慢变为粉末状,失去其本身的突出优势,通透性和保水性会有所降低。所以更适宜与其它基质搭配使用,并每间隔1-2年换盆换土一次。
蛭石有多种规格,既有块状、片状也有颗粒状的,园艺用一般采用颗粒状的蛭石为最佳。考虑到其本身存在粉化性,大家在挑选颗粒基质时不易选择过小的颗粒,1-3毫米的颗粒形同粉末状,3-5毫米颗粒则最为实用。
小颗粒纯蛭石可以单独用于充当扦插基质,但不宜单独用来栽培盆栽植物,因为蛭石除了含有一些矿物微量元素,几乎不含其它营养成分,与泥炭、珍珠岩等其它基质搭配使用可以取长补短,按泥炭、珍珠岩、蛭石,5:2:3的比例进行配土基本能适应大部分盆栽植物的生长需要。
泥炭、珍珠岩、蛭石,配土好搭档
蛭石作为透气和保水性良好的颗粒基质,兼具土壤改良、稳定土壤酸碱度以及提供矿物微量元素的多重作用,在扦插繁殖、促进根系生长发育上确实有突出的优势,但易粉化、自重过轻、浇水易浮起,也算是美中不足,好在园艺领域的颗粒基质相当多,麦饭石、赤玉土、鹿沼土等也都是常用的配土颗粒基质,大家也可以根据实际需要进行选择,扬长避短就可以了!
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