茎培养的注意事项(植物茎段培养注意事项)

1. 植物茎段培养注意事项

果树嫁接如何培育矮作砧木？凡是喜欢嫁接果树的人都知道，砧木粗度必须要超过香烟杆粗，嫁接操作方便快捷，成活率高。砧木太细小，嫁接时操作很不方便，很难保障操作到位，很难确保成活。因为，砧木越粗越好，起粗砧木根系越发达，吸收水分能力越强，为接穗输送的水分越多，越充足，成活率越高。解决果树砧木矮化粗壮的办法有四种方法。

　　第一，多施有机肥。果树的茎、根、叶的生长是属于营养生长，需要的营养物质是氮肥。而磷钾肥是果树生殖生长的物质基础。磷钾肥的增多，就会有一定程度上抑制果树的营养生长，使果树长粗长壮变矮，控制果树长高，是增粗的好办法。

　　第二，偏施磷钾肥。若是使用化肥，可以减少氮肥的用量，从而增加磷钾肥的用量，和施有机肥一样的道理，抑制果树的营养生长，控制果树长高，诱导果树向生殖方向转化，从而促使果树矮化，茎杆变粗变壮，比使用有机肥效果更加明显。

　　第三，叶面喷施磷钾肥。使用叶面肥，为果树叶面补充磷钾肥，抑制果树营养生长，迫使果树转向生殖生长，能够快速的促使果树变成粗壮变矮。一般使用0.2～0.4%磷酸二氢钾溶液叶面喷雾，每隔7天一次，连喷2～3次，效果非常明显。

　　第四，植物生长调节剂促使矮壮。植物生长调节剂的延缓剂多效唑、烯效唑、矮壮素等等药剂，都能抑制果树细胞的伸长，但不抑制细胞的分裂，从而控制果树的长高，抑制果树的营养生长，促使生殖生长，使果树变粗变壮变矮。

　　总之，使果树砧木变粗变壮变矮，可以通过营养的调控，生理的调节，可以使果树砧木从营养生长转向生殖生长，从而达到果树砧木矮化的目的。

2. 植物茎段培养注意事项包括

茎尖培养无需再分化就可以长出丛生芽，继代培养后只要诱导生根就行了，用于快繁时可以算是一种微扦插。

3. 植物茎段培养实验报告

植物器官培养主要是指对植物的根、茎、叶等器官进行的离体培养。植物器官培养取得成功的事例很多，应用的范围也很广，是植物组织培养中最重要的方面之一。在生产上，植物器官培养具有极其重要的应用价值。通过离体器官培养开发的植物快速繁殖技术，可在短期内提高繁殖效率，加速优良品种和名贵品种的繁殖速度。

4. 简述植物茎段培养方法

植物的组织培养是利用无性生殖的原理，使植物组织在无菌控制的条件下，通过细胞的分裂和分化，快速发育成完整的植物体的高新技术手段.

植物的组织培养是指在无菌的条件下，利用无性生殖原理，将植物的茎尖、茎段或叶片等切成小块，培养在特定的培养基上，通过细胞的分裂和分化，使它逐渐发育成完整的植物体

们利用植物可以进行无性生殖的原理，研究出了组织培养技术，组织培养是指在无菌的条件下，将植物的茎尖、茎段或叶片等切成小块，培养在特定的培养基上，通过细胞的分裂和分化，使它逐渐发育成完整的植物体的高新技术手段，利用组织培养技术，可以在短时间内大批量的培育出所需要的植物新品种，还可以防止植物病毒的危害，极大的提高了农业生产效率.

5. 茎段培养的特点

①无菌材料获得。取歧花铁兰花已凋谢的植株，切掉根部，逐层剥掉基部叶片，可看到叶腋间带有浅棕色鞘叶的吸芽。小心的沿短缩茎向上剥掉所有叶片，最后切掉顶部的叶片，保留1～2mm的叶基或直接切掉茎尖。用0.1%HgCl2水溶液振荡消毒10min（加2滴吐温），无菌水冲洗5～6次后，再用无菌纸吸干水分，在超净台上吹干。

取消毒好的外植体，用力切去被HgCl2水溶液接触到的伤口部分，纵切2块或不切，小切块基部向下竖直接种到培养基。每块茎外植体都有一个或部分侧芽，主要诱导侧芽萌发形成丛生芽。

6. 园林植物栽培养护知识点

　　园林要学高等数学，因为高等数学是所有专业的必修课程。　　园林专业主要培养从事园林植物繁育、养护管理与应用，城乡各类园林绿地的规划与设计，园林施工组织与管理等方面的高级复合型科学技术人才。　　专业核心课程：园林树木学、园林花卉学、园林植物栽培养护学、园林苗圃学、园林植物遗传育种学、城市绿地系统规划、园林设计、园林建筑设计、园林工程、园林管理等。　　主要实践环节：园林专业综合性、设计性实验、实习课程数量较多，主要表现为园林树木学、园林花卉学、园林苗圃学、园林植物栽培养护学、园林植物遗传育种学等课程实验实习；园林设计、园林建筑、园林工程、园林综合Studio等课程设计；南方综合实习；毕业实习及毕业论文（设计）等。

7. 茎段培养过程

1/2MS+0.5mol/L NAA

（1）配制ms大量元素母液 　　一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。 　　分别称取 　　nh4no3 165g kh2po4 17g 　　kno3 190g cacl2·2h2o 44g 　　mgso4·7h2o 37g 　　各自配成1l的母液。倒入1l试剂瓶中，存放于冰箱中。 　　（2）配制ms微量元素母液 　　一般将微量元素配制成100倍母液。 　　依次称取 　　ki 0.083g na2moo4·2h2o 0.025g 　　h3bo3 0.62g cuso4·5h2o 0.0025g 　　mnso4·h2o 1.69g cocl2·6h2o 0.0025g 　　znso4·7h2o 0.86g 　　配成1l母液，倒入1l试剂瓶中，存放于冰箱中。 　　cuso4·5h2o和cocl2·6h2o 由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。 　　分别称取 　　cuso4·5h2o 0.05g cocl2·6h2o 0.05g 　　各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。 　　（3）配制ms有机母液 　　一般配制成100倍ms有机母液。 　　依次称取 　　肌醇 10g 盐酸硫胺素（vb1） 0.01g 　　烟酸 0.05g 甘氨酸 0.2g 　　盐酸吡哆醇（vb6） 0.05g 　　配成1l母液，倒入1l试剂瓶中，存放于冰箱中。 　　（4）配制ms铁盐母液 　　一般配制成100倍ms铁盐母液。 　　依次称取 　　edta二钠 3.73g feso4·7h2o 2.78g 　　配成1l母液，倒入1l试剂瓶中，存放于冰箱中。 　　所以ms母液有5种大量元素母液，加上ms微量元素母液、ms有机母液和ms铁盐母液，共8种母液。 　　激素母液的配制 　　各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的naoh溶解，细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解，然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。 　　2、配制培养基 　　以配置1l ms培养基为例，按顺序进行如下操作： 　　（1）先在烧杯中放入一些蒸馏水。 　　（2）分别取上面八种母液10ml倒入。 　　（3）一般称取30g蔗糖倒入，搅拌溶解。 　　（4）加蒸馏水用量筒定溶至1l。 　　（5）按设计好的方案添加各种激素，由于激素的用量很小，而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取，减少误差。 　　（6）用精密试纸或酸度计调整ph至5.7-5.8。（有条件的话使用酸度计，比较精确） 可配1当量的hcl和1当量的naoh用来调溶液ph值。 　　1当量hcl配制：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。 　　1当量naoh配制：称取naoh 4g 配成100ml溶液。 　　（7）称取5g左右琼脂粉（质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中，放在电炉上加热至沸腾，直到琼脂粉熔化。 　　（8）稍微冷却后，分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口，用橡皮筋或绳子扎紧。 　　（9）放入消毒灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右。 　　（10）灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平放在实验台上令其冷却凝固。

二、灭菌

　　灭菌是组织培养重要的工作之一。初学者要清楚有菌和无菌的范畴。有菌的范畴是：凡是暴露在空气中的物体，接触自然水源的物体，至少它的表面都是有菌的。依此观点，无菌室等未处理的地方、超净台的表面、简单煮沸的培养基、我们使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及与外界相连的内表，如整个消化道、呼吸道，即我们呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌的。 　　这里所指的菌，包括细菌、真菌、放线菌、藻类及其他微生物。菌的特点是：极小，肉眼看不见。无处不在，无时不有，无孔不入。在自然条件下忍耐力强，生活条件要求简单，繁殖力极强，条件适宜时便可大量滋生。 　　无菌的范畴是：经高温灼烧或一定时间蒸煮过后的物体，经其他物理或化学的灭菌方法处理后的物体（当然这些方法必须已经证明是有效的），高层大气、岩石内部、健康的动、植物的不与外部接触的组织内部，强酸强碱，化学元素灭菌剂等表面和内部都是无菌的。从以上可以看出：在地球表面无菌世界要比有菌世界小的多。 　　灭菌是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。与此相关的一个概念是消毒，它指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用，显然经过消毒，许多细菌芽孢、霉菌厚垣孢子等不会完全杀死，即由于在消毒后的环境里和物品上还有活着的微生物，所以通过严格灭菌的操作空间（接种、超净台等）和使用的器皿，以及操作者的衣着和手都不带任何活着的微生物。在这样的条件下进行的操作，就叫做无菌操作。 　　植物组织培养对无菌条件的要求是非常严格的，甚至超过微生物的培养要求，这是因为培养基含有丰富的营养，稍不小心就引起杂菌污染。要达到彻底灭菌的目的，必须根据不同的对象采取不同的切实有效的方法灭菌，才能保证培养时不受杂菌的影响，使试管苗能正常生长。 　　常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类，即：物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。 　　1、培养基用湿热灭菌 　　培养基在制备后的24小时内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1mpa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。 　　注意完全排除锅内空气，使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底。高压灭菌放气有几种不同的做法，但目的都是要排净空气，使锅内均匀升温，保证灭菌彻底。常用方法是：关闭放气阀，通电后，待压力上升到0.05mpa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。 　　关阀再通电后，压力表上升达到0.1mpa时，开始计时，维持压力0.1-0.15mpa，20分钟。 　　按容器大小不同，保压时间有所不同，见表。该表所列数字是彻底灭菌很保险的数字，如果容器体积较大，但是放置的数量很少，也可以减少时间。

三、接种

　　接种时由于有一个敞口的过程，所以是极易引起污染的时期，这一时期主要由空气中的细菌和工作人员本身引起，接种室要严格进行空间消毒。接种室内保持定期用1%-3%的高锰酸钾溶液对设备、墙壁、地板等进行搽洗。除了使用前用紫外线和甲醛灭菌外，还可在使用期间用70%的酒精或3%的来苏儿喷雾，使空气中灰尘颗粒沉降下来。无菌操作可按以下步骤进行： 　　（1）在接种4小时前用甲醛熏蒸接种室，并打开其内紫外线灯进行杀菌； 　　（2）在接种前20分钟，打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯； 　　（3）接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换穿拖鞋等； 　　（4）上工作台后，用酒精棉球搽拭双手，特别是指甲处。然后搽拭工作台面； 　　（5）先用酒精棉球搽拭接种工具，再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍，然后反复过火尖端处，对培养皿要过火烤干； 　　（6）接种时，接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽等； 　　（7）接种完毕后要清理干净工作台，可用紫外线灯灭菌30分钟，若连续接种，每5天要大强度灭菌一次。 　　接种是将已消毒好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块，放入培养基的过程。现将接种前后的程序连贯地介绍。 　　无菌接种步骤： 　　（1）将初步洗涤及切割的材料放入烧杯，带入超净台上，用消毒剂灭菌，再用无菌水冲洗，最后沥去水分，取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。 　　（2）材料吸干后，一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀，对材料进行适当的切割。如叶片切成0.5cm平方的小块；茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含1-2片幼叶的茎尖大小等。在接种过程中要经常灼烧接种器械，防止交叉污染。 　　（3）用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。具体操作过程（以试管为例）是：先解开包口纸，将试管几乎水平拿着，使试管口靠近酒精灯火焰，并将管口在火焰上方转动，使管口里外灼烧数秒钟。若用棉塞盖口，可先在管口外面灼烧，去掉棉塞，再烧管口里面。然后用镊子夹取一块切好的外植体送入试管内，轻轻插入培养基上。若是叶片直接附在培养基上，以放1-3块为宜。至于材料放置方法除茎尖、茎段要正放（尖端向上）外，其他尚无统一要求。接种完后，将管口在火焰上再灼烧数秒种。并用棉塞，塞好后，包上包口纸，包口纸里面也要过火。

四、培养

　　培养指把培养材料放在培养室（有光照、温度条件、无菌）里，使之生长，分裂和分化形成愈伤组织或进一步分化成再生植株的过程。 　　1、培养方法 　　（1）固体培养法 　　即用琼脂固化培养基来培养植物材料的方法。是现在最常用的方法。虽然该方法设备简单，易行，但养分分布不均，生长速度不均衡，并常有褐化中毒现象发生。 　　（2）液体培养法 　　即用不加固化剂的液体培养基培养植物材料的方法。由于液体中氧气含量较少，所以通常需要通过搅动或振动培养液的方法以确保氧气的供给，采用往复式摇床或旋转式摇床进行培养，其速度一般为50-100r/min，这种定期浸没的方法，既能使培养基均一，又能保证氧气的供给。

8. 在植物组织培养中如何选择茎段

进行组织培养所采用的植物茎段位于植物的茎尖分生组织，也即是植物生长点的植物组织。这部分的植物细胞旺盛分类，尚未分化成具有导管的成熟组织。

细菌或病毒的在植物组织中的扩散一般要借助疏导组织的导管通道，因此可以说致病微生物的传播速度赶不上植物茎尖的分裂速度。

这样采用无毒的茎尖进行无菌组培，产生的组培苗自然就是健康的脱毒苗了。

9. 植物的生长过程和培养注意事项

一般来说，植物生长需要的基本条件是:适度阳光、空气和适量水分。

植物生活所必需的五大要素是：阳光、温度、水分、空气、养料，它们是植物的生命线。温度对植物生长发育有着很大的影响。植物在不同的生长时间期和不同的发育阶段，都需要不同的，一定的合适温度；水是植物的重要构成部分；空气中的氧、氮、二氧化碳对植物生活影响极大；植物需要的养料很多，有碳、氢、氧、氮、磷、钾、钙、硫、镁、铁等10 多种元素。

空气影响动植物的生活。植物的光合作用需要一氧化碳，动物的呼吸需要氧气等。

只有在光照条件下，植物才能进行光合作用，制造有机物，并日储存能量。光对植物的生理和分布起着决定性的作用。有些植物只有在强光下才能生长得好，如小麦、玉米等。

10. 植物茎段培养注意事项有哪些

         发财树常采用播种的方法育苗，但是一些优质的种子主要来源于国外，海南可以自产少量，种子的取材不方便，并且播种育苗所需要的周期较长。发财树还可采用扦插育苗的方法，但是实际生产中发现，扦插苗存在头茎不膨大或只略微膨大、苗秆不美观的缺陷。

        1、在每年的6月份，选取当年生，长度为16cm的顶梢作为插穗，将插穗完全放入浸泡液中浸泡40分钟，然后取出插穗并对其进行超声处理10分钟，其中浸泡液由以下重量份的组分制成:钼酸钠0.5份、硼酸锌0.1份、凯迪奥铵盐1份、川楝子19份、大黄茎21份、半夏15份、白沙篙10份、川芎17份、桑白皮18份、水290份，超声处理时，超声波的频率为35KHz。

          2.将超声处理后的插穗插入育苗基质中，插入的深度为3cm，其中育苗基质由以下重量份的组分制成：素沙60份、蛭石15份、草木灰6份、紫葳根3份、龙船花根2份；将紫葳根、龙船花根研成平均粒径为10目的碎粒，然后与素沙、蛭石、草木灰混合均匀后，制得育苗基质。

          3、在上午8点，对插穗进行浇水，每两天浇水一次，每棵插穗每次浇水600ml。

         4、将育苗盆上午9点至11点放在室外充分光照，下午3点至7点继续将其放在室外进行光照，之后将育苗盆移至室内，对插穗喷洒营养液，然后采用紫光，继续对其照射30分钟，其中营养液由以下重量份的组分制成：延胡索19份、荜拨14份、鹿衔草10份、黄荆子13份、白芷15份、水230份。紫光的光照强度为160勒克斯。